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　　又一个无法重复的实验

　　作者：一千零一刀

　　方舟子，

　　你好，我是一个可怜的破死刀，夜以继日只求早日毕业。实验室最近资金紧
张，老板抠门，只得找到一些旁门左道的方法来做实验。

　　最近看了国内学者2003年在Nucleic Acids Research上的一篇文章
http://nar.oxfordjournals.org/content/31/20/e123.full.pdf+html。文中提
到的方法，似乎是能够显着地减少使用探针，并远远优于SYBR GREEN。虽然已经
被坑害了无数次，但是看到10年内，这篇文章被引用了数十次，我们还是采用了。

　　在所有的实时PCR中，这种方法没有办法获得正常的扩增曲线。后来，我们
只好完全按照文章中的序列，合成我们能够做的引物和探针，但依然没有成功重
复文章中的结果。使用此方法的问题是PCR开始后，荧光信号直接增加，不存在S
形扩增曲线，也就有没有办法获得Ct值。重复合成引物和探针，以及购买试剂也
是如此。几个兄弟反复几次，无一例外，跟文章中发表的漂亮结果完全不同。同
时，同期合成的其他的TaqMan反应都正常，仪器肯定没有问题。我们不得不认为
这篇文章有可能是另一个坑。

　　这些天来，郁闷至极，看了引用这篇文章的文章，发现除了自引之外，没有
谁真正重复过这个实验。

　　我们曾经与作者联系过，请作者帮忙解决，但是没有任何回复。

　　如果可能，请发出来让大家看看，这个方法是不是没法重复。如果不能也提
醒大家不要继续上当了。

　　谢谢！

(XYS20130219)

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